Ньюкаслская болезнь (НБ) является одной из наиболее значимых угроз для мировой птицеводческой отрасли. Заболевание сопровождается падежом птицы, снижением продуктивности и приводит к существенным экономическим потерям и торговым ограничениям [1, 5]. Возбудителем НБ являются вирулентные штаммы avian orthoavulavirus 1 (AOaV-1), ранее avian paramyxovirus 1 (APMV-1). [7].
Впервые описанная в 1926 году [1], ньюкаслская болезнь поражает более 200 видов птиц — наиболее восприимчивы куры, наименее — водоплавающие [2, 5]. Вспышки велогенных штаммов сопровождаются летальностью до 100% [5]. НБ подлежит обязательному уведомлению в WOAH, и выявление вирулентных штаммов может повлечь ограничения на экспорт птицеводческой продукции [3].
Современные исследования подтверждают высокую генетическую вариабельность вируса, связанную с циркуляцией множества генотипов и их постоянной эволюцией [6]. Эти различия влияют на вирулентность и особенности иммунного ответа, что имеет принципиальное значение при разработке вакцинных стратегий [4, 6]. Поэтому портфель вакцин Polygene против ньюкаслской болезни формируется с учётом этих вызовов.
Вакцинация остаётся ключевым инструментом контроля НБ, однако не обеспечивает стерильного иммунитета [4] и должна применяться в составе комплексной программы, включающей биобезопасность, менеджмент и санитарно-гигиенические практики [3].
Alexander [1, 5], Spickler [2], WOAH [3], Cornax et al. [4], Berihulay et al. [6], ICTV [7] – указаны для внутреннего ориентира
НБ вызывается птичьим ортоавулавирусом 1 (AOAV-1), РНК-содержащим вирусом семейства Paramyxoviridae. Вирусный белок HN прикрепляется к содержащим сиаловую кислоту гликопротеинам на поверхности клеток, а белок F обеспечивает слияние с клеточной мембраной. Аминокислотная последовательность сайта расщепления F-белка определяет вирулентность штамма. После проникновения через слизистые оболочки дыхательных путей или пищеварительного тракта, богатые рецепторами с сиаловой кислотой, вирус реплицируется локально, затем распространяется c током крови.
Филогенетический анализ последовательности гена белка слияния (F) позволяет классифицировать штаммы ВНБ на два класса: класс I (авирулентные) и класс II (более 21 генотипа различной вирулентности). Генетическая вариабельность требует регулярного пересмотра вакцинных стратегий.
Штаммы классифицируют на:
- Вирулентные (vNDV) — велогенные и мезогенные, подлежат обязательному уведомлению;
- Низковирулентные (loNDV) — лентогенные, основа живых вакцин
Тяжесть инфекции зависит от вирулентности и тропизма штамма, генотипа вируса, возраста, иммунного статуса и видовой восприимчивости птицы. Вирулентные штаммы вызывают дыхательную недостаточность, неврологические расстройства и внезапную смерть. Низковирулентные штаммы проявляются легкими респираторными признаками или протекают бессимптомно. Сопутствующие инфекции и неблагоприятные условия содержания могут значительно усиливать тяжесть заболевания даже при инфекции авирулентными штаммами.
С момента обнаружения НБ вирулентные штаммы ВНБ эндемичны во многих странах. Штаммы генотипа VII после 4-ой панзоотии доминируют в Азии, Европе, на Ближнем Востоке и в Африке, утвердившись в качестве одного из доминирующих и важнейших глобальных генотипов.
Источники инфекции:
- Домашняя и дикая птица (включая водоплавающих и перелетных)
- Живые рынки птицы
- Необезвреженные тушки и боенские отходы
- Голуби и импортированные попугаеобразные
Основные пути передачи:
- Аэрогенный — вдыхание контаминированного аэрозоля от инфицированных птиц, зараженной пыли
- Алиментарный — поедание контаминированного корма и воды
- Персонал, оборудование, транспорт
- Механический перенос (собаки, грызуны, насекомые)
- Перемещение инфицированной птицы и продукции промышленного птицеводства
Инкубационный период: 4-6 дней (от 2 до 15 дней). Выделение вируса ньюкаслской болезни через орофарингальный или клоакальный пути имеет эпидемиологическое значение для распространения. Оно начинается с выделения вируса инфицированными птицами. Поедание контаминированного ВНБ корма и воды или вдыхание зараженного воздуха являются двумя основными путями передачи НБ среди птиц.
Патогномоничных признаков НБ не существует — клинические проявления широко варьируют в зависимости от патотипа вируса, вида хозяина, возраста птицы, сопутствующих инфекций, стресс-факторов окружающей среды и иммунного статуса. Определенные симптомы действительно ассоциируются с конкретными вирусами, что послужило основанием для группировки вирусов в пять патотипов на основе преобладающих признаков у пораженных кур. Заболевание развивается быстро, охватывая стадо за 4-6 дней. Молодняк более восприимчив.
Висцеротропная велогенная форма:
- Внезапная высокая смертность при минимальных клинических признаках (крайне вирулентные штаммы)
- Вялость, отказ от корма, прострация
- Выраженный респираторный дистресс, иногда со свистящим дыханием
- Слизистые выделения из ротовой полости
- Водянистая зеленоватая диарея
- Отек вокруг глаз и головы, цианоз гребня
- Неврологические признаки (кривошея) при менее остром течении
- У несушек — яйца с мягкой скорлупой, измененным цветом и водянистым белком, или полное прекращение яйцекладки
- Заболеваемость и смертность до 100% в невакцинированных популяциях
Нейротропная велогенная форма:
- Птицы остаются активными до развития неврологических признаков (кривошея, атаксия, параличи)
- Респираторные признаки (чихание, кашель, ринит), за которыми следуют неврологические;
- Тремор, судороги, кривошея, опистотонус;
- Параличи крыльев и ног, круговые движения;
- Заболеваемость до 100%, смертность до 50% (до 90% у молодняка).
Мезогенная форма:
- Респираторные признаки у молодняка — хрипы, кашель, чихание
- Неврологические признаки как следствие респираторных симптомов
- Снижение яйценоскости с восстановлением через несколько недель
- Некоторые штаммы (например, голубиного происхождения) вызывают диарею с неврологическими признаками и значительным снижением яйценоскости
- Смертность умеренная (<50%), выше у молодняка
Лентогенные и низковирулентные штаммы:
- От бессимптомного течения до лёгких респираторных признаков;
- Вторичные инфекции могут существенно утяжелять клиническую картину;
- У взрослых птиц — чаще субклиническое течение, у молодняка — хрипы, чихание, кашель.
У несушек снижение яйценоскости может предшествовать более явным признакам заболевания и падежу. Многократно вакцинированные несушки с устойчивым иммунитетом могут не проявлять признаков инфекции за исключением снижения яйценоскости. Вакцинированная птица в зависимости от уровня антител защищена от падежа, клинических проявлений и снижения продуктивности
Патогномоничных поражений НБ не существует. Характер и выраженность изменений зависят от патотипа вируса.
Висцеротропная велогенная форма:
- Геморрагические поражения кишечного тракта — наиболее характерные изменения, особенно выражены в железистом желудке, двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишке
- Некроз селезёнки и тимуса с кровоизлияниями и отёком
- Мультифокальные некротико-геморрагические участки на слизистой кишечника, преимущественно в области лимфоидных образований (слепокишечные миндалины, пейеровы бляшки)
- На серозных оболочках наблюдаются петехии и кровоизлияния
- У несушек — желточный перитонит с атрофированными фолликулами
Нейротропная велогенная и мезогенная формы:
- Гиперемия и кровоизлияния в трахее и легких
- Аэросаккулит (воспаление воздухоносных мешков)
- Гиперемия мозговых оболочек с умеренными мультифокальными петехиальными кровоизлияниями
- Макроскопические изменения в ЦНС обычно отсутствуют даже при выраженных неврологических признаках
- У несушек — желточный перитонит с атрофированными фолликулами
Лентогенные формы:
- Изменения ограничиваются гиперемией и слизистым экссудатом в дыхательных путях
- Помутнение и утолщение воздухоносных мешков
- Вторичные бактериальные инфекции значительно усиливают тяжесть респираторных поражений
Микроскопические изменения неспецифичны: гиперемия, некроз, инфильтрация, отек. В ЦНС — негнойный энцефаломиелит.
Диагноз НБ ставится комплексно с учетом:
- Производственных показателей
- Клинических проявлений
- Патологоанатомических изменений
- Серологического мониторинга
- ПЦР диагностики и выделения РНК вируса
Лабораторные методы
1. Молекулярная диагностика
ОТ-ПЦР (RT-PCR) в реальном времени — быстрое обнаружение РНК ВНБ
- Детекция РНК НБ в патологическом материале
- Дифференциация вирулентных и авирулентных штаммов
- Секвенирование для определения аминокислотной последовательности в сайте расщепления F-белка
- Трахеальные или орофарингеальные мазки предпочтительны как образцы выбора — легко обрабатываются и содержат минимум посторонних органических веществ, которые могут интерферировать с выделением РНК и ПЦР-амплификацией
- Следует учитывать ограниченную чувствительность метода при исследовании некоторых органов, особенно фекалий
2. Серология
Оценка уровня антител в сыворотке крови
- РТГА (HI) — наиболее распространенный метод, направленный на антитела к HN-белку
- ИФА (ELISA) — широко применяется в современном птицеводстве, может выявлять антитела к нескольким антигенам одновременноренциация вирулентных и авирулентных штаммов
- Нарастание титра в парных сыворотках при отсутствии вакцинации указывает на контакт с полевым вирусом
- ИФА демонстрирует высокую воспроизводимость, чувствительность и специфичность, хорошо коррелирует с РТГА
3. Изоляция вируса
- Инокуляция СПФ куриных эмбрионов
- Референс-метод диагностики, но трудозатратный и длительный
- Сыворотка крови для серологии
- Применяется преимущественно для диагностики первичных случаев вспышки и получения изолятов для дальнейшего лабораторного анализа
Отбор проб
От павших птиц
- Орально-назальные и клоакальные мазки (или кишечное содержимое)
- Образцы органов: легкие, воздухоносные мешки, кишечник, селезенка, почки, слепокишечные миндалины, мозг, печень, сердце
От живых птиц
- Трахеальные или орофарингальные мазки
- Клоакальные мазки (должны быть визуально покрыты фекальным материалом)
Образцы с одинаковых анатомических участков могут объединяться в пулы (клоакальные с клоакальными, орофарингальные с орофарингальными), обычно по 5 проб. Мазки-отпечатки на FTA карты как альтернативный метод.
Дифференциальная диагностика
Основной дифференциальный диагноз: высокопатогенный грипп птиц
Другие заболевания:
- ИБК, ИЛТ, МПВИ
- Микоплазмоз, пастереллез
- ИББ
Специфического лечения НБ не существует. Эффективная профилактика основывается на трехуровневой системе биобезопасности в сочетании с вакцинацией.
Трехуровневая система биозащиты
Уровень 1 — Внешняя биобезопасность (контроль периметра)
Предотвращение заражения через корма, воду, вредителей или диких птиц, а также борьба с вредителями и дикими птицами для ограничения контакта с потенциальными резервуарами птичьих патогенов.
- Территориальное планирование с учетом розы ветров и миграционных путей
- Меры по недопущению гнездования и проникновения диких птиц в производственную зону (осушение водоемов, выравнивание грунта, отпугивание птиц)
- Санитарные пропускники с душем и обязательной сменой одежды и обуви
- Для внешнего транспорта дезинфекционные блоки для мойки кузова, а не только колес
- Дезинфекция поступающего инвентаря
- Термическая обработка кормов
- Комплектование репродукторов второго порядка инкубационным яйцом только с предприятий с сопоставимым или более высоким уровнем биозащиты
Уровень 2 — Внутренняя биозащита (изоляция птичников)
Внутренние меры биобезопасности (зональный уровень) направлены на минимизацию распространения инфекционных агентов на площадке.
- Защита птичников, кормохранилищ и водоснабжения от проникновения диких птиц
- Санитарные пропускники с душем и обязательной сменой одежды и обуви, закрепленной за каждым корпусом
- Посещение корпусов от младшего к старшему возрасту. Проблемные корпуса посещаются последними
- Раздельные логистические процессы (сбор яиц, вскрытие, вывоз павшей птицы)
- Закрепленный за зонами внутренний транспорт
- Дезинфекционные барьеры между производственными зонами
- Дезинсекция и дератизация
Уровень 3 — Операционная биозащита (ежедневные процедуры)
Обеспечение комплексного взаимодействия биозащиты, мониторинга и предотвращения возникновения вспышек заболевания среди стад.
- Контроль персонала: обучение, исполнение протоколов биобезопасности, средства индивидуальной защиты
- Целевая дезинфекция: ежедневная обработка оборудования специфическими дезинфектантами против ВНБ
- Активный мониторинг: ежедневное наблюдение за поголовьем, риск-ориентированный отбор проб, серомониторинг с достаточным количеством проб, интеграция цифровых систем раннего выявления
- Санитарно-гигиенические меры: контроль кормов и воды, дератизация, дезинсекция, управление отходами
Вакцинация
Вакцинация дополняет биобезопасность всех уровней, но не заменяет ее.
Типы вакцин:
- Живые лентогенные (VG-New, C-Clone, La Sota) —основа программ, массовое или индивидуальное применение
- Инактивированные масляные — перспективное направление разработки. Применяются на родительских стадах и несушке не только для формирования продолжительного и напряженного иммунитета у продуктивных кур и кур родительских стад, но и для создания прогнозируемого пассивного иммунитета у цыплят.
- Векторные рекомбинантные —— в активной разработке. Платформа построена на рекомбинантном вирусе герпеса индеек (rHVT), который позволяет применять препараты in ovo или на выводе в инкубатории. Защита формируется ещё до того, как цыплёнок встречается с внешней средой.